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小鼠肾系膜细胞

价格:¥3580

简要描述:小鼠肾系膜细胞主要功能:
(1) 系膜细胞能分泌系膜基质,胞吞和加工血浆大分子,通过系膜细胞收缩和分泌血管活性激素控制肾小球血流动力学。
(2) 肾系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现。
(3) 细胞培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。

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详细介绍
品牌自营品牌货号MIC-CELL-0020
规格5*10^5供货周期两周
主要用途科研

小鼠肾系膜细胞运输和保存

发送复苏存小鼠肾系膜细胞方式:

(1)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时具体操作见细胞培养步骤。

2收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 

细胞接受后的处理:

1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。

4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。

5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

                       

细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备基础培养基100%;北美胎牛血清5%添加剂1%;双抗1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×105进行传代。

2吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS(pH7.4)清洗细胞培养瓶2次。

33ml细胞消化液加入细胞培养瓶,轻轻摇动,使细胞消化液覆细胞培养瓶底。

注:推荐客户用钬飞生物原代细胞消化液。

4细胞培养瓶置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养2分钟后,在显微镜下观察原代细胞的消化状态。

请记住:如贴壁细胞逐渐趋于圆形、部分悬浮后,用手指轻轻拍打细胞培养侧部至大部分贴壁细胞悬浮,加入3ml血清终止液,终止细胞消化。每种原代细胞的消化时间是有差异的。

5吹打培养瓶中悬浮细胞若干次,再吸出细胞悬浮液,转入15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。注:推荐客户用钬飞生物原代细胞培养体系。

6弃离心管中液体,加入原代细胞培养液重悬细胞。细胞计数,确定细胞数量。

7细胞分瓶后,加入适量原代细胞培养液至细胞培养瓶中,置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养24小时。

 

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

 

配套培养体系(500ml/套)
货号名称价格
MED-SUP-0001上皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0003平滑肌细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0003平滑肌细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0001上皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0002内皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0002内皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0008肝实质细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0002内皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0003平滑肌细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0002内皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0002内皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0001上皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0001上皮细胞培养体系¥3,580
MED-SUP-0001上皮细胞培养体系¥3,580
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