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大鼠主动脉平滑肌细胞

价格:¥3580

简要描述:大鼠主动脉平滑肌细胞请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

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详细介绍
品牌自营品牌货号RAT-CELL-0009
规格5 × 10^5细胞数/1ml供货周期两周
主要用途科研

一、运输和保存
1、发送复苏大鼠主动脉平滑肌细胞方式:
(1)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时。具体操作见细胞培养步骤。
(2)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
 
2、大鼠主动脉平滑肌细胞接收后的处理:
(1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
(2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
(3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。
(4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
(5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
                       
二、细胞培养步骤
1、培养基及培养冻存条件准备:
(1) 准备基础培养基100%;北美胎牛血清5%,添加剂1%;双抗1%。
(2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
2、 细胞处理:
(1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
(2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
3、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
(1)选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×105进行传代。
(2)吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS(pH7.4)清洗细胞培养瓶2次。
(3)3ml细胞消化液加入细胞培养瓶,轻轻摇动,使细胞消化液覆细胞培养瓶底。
(4)细胞培养瓶置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养2分钟后,在显微镜下观察原代细胞的消化状态。
请记住:如贴壁细胞逐渐趋于圆形、部分悬浮后,用手指轻轻拍打细胞培养侧部至大部分贴壁细胞悬浮,加入3ml血清终止液,终止细胞消化。每种原代细胞的消化时间是有差异的。
(5)吹打培养瓶中悬浮细胞若干次,再吸出细胞悬浮液,转入15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。
(6)弃离心管中液体,加入原代细胞培养液重悬细胞。细胞计数,确定细胞数量。
(7)细胞分瓶后,加入适量原代细胞培养液至细胞培养瓶中,置于5%CO2、95%空气、37oC培养箱静置培养24小时。

下面T25瓶为类;
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

武汉钬飞生物科技有限公司主要产品和服务介绍:
一、原代细胞服务:
       各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
       多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
       原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
       原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务

二、细胞系服务:
       细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
       细胞系培养过程的技术指导
       细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等

三、iPS细胞服务:
       iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
        iPS细胞增殖及冷冻保存
        iPS基础培养技术实习
       新药及实验仪器上市前评估
四、其他技术外包服务、客户定制服务等

循环系统(5 × 105/1ml)
货号名称价格
RAT-CELL-0006心肌细胞¥3,580
RAT-CELL-0007心肌成纤维细胞¥3,580
RAT-CELL-0008主动脉内皮细胞¥3,580
RAT-CELL-0009主动脉平滑肌细胞¥3,580
RAT-CELL-0051大隐静脉平滑肌细胞¥3,580
RAT-CELL-0052冠状动脉平滑肌细胞¥3,580
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