咨询热线
13627218621
ARTICLE/ 技术文章
首页  >  技术文章  >  学会这些,轻松完成小鼠气管上皮细胞的原代培养

学会这些,轻松完成小鼠气管上皮细胞的原代培养

发布时间:2021-04-26浏览:45次
  小鼠气管上皮细胞分离自小鼠气管组织,分布于小鼠气管内表面,细胞贴壁生长,呈铺路鹅卵石状镶嵌排列,胞体肥厚、透明,呈菱形或多角形,形成多个小岛样克隆。
  
  气管上皮是气道与外界环境接触的防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内原组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,在基础及临床研究中很重要。
  
  小鼠气管上皮细胞使用方法: 
  
  1、取出25cm2 培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
  
  2、待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
  
  3、细胞传代:
  
  ①吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
  
  ②添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化。
  
  ③用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
  
  ④待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
  
  小鼠气管上皮细胞注意事项: 
  
  1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月。 
  
  2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。 
  
  3、传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。 
  
  4、小鼠气管上皮细胞只可用于科研。