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培养大鼠角膜上皮细胞这些功能和处理方法不得不了解

发布时间:2021-03-26浏览:133次
  大鼠角膜上皮细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。
  
  角膜上皮细胞主要功能如下:
  
  1、角膜是无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞。
  
  2、角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统。
  
  3、角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
  
  大鼠角膜上皮细胞细胞处理:
  
  1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。24小时后换液并检查细胞密度。
  
  2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
  
  另外关于大鼠角膜上皮细胞传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。