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大鼠主动脉平滑肌细胞的细胞特性及实验步骤说明

发布时间:2020-11-09浏览:64次
  大鼠主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧的2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至4胸椎体下缘移行为降主动脉;在2胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。
  
  大鼠主动脉平滑肌细胞细胞特性:
  
  1、组织来源于实验动物的正常主动脉组织。
  
  2、细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性。
  
  3、经鉴定细胞纯度高于90%。
  
  4、不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
  
  5、细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
  
  大鼠平滑肌细胞实验步骤:
  
  1、SD大鼠(150-200g),断头,浸入75%的酒精中15min。
  
  2、置入超净台中,将大鼠固定于杀鼠板上,在无菌条件下打开腹腔,分离出胸主动脉、腹主动脉,摘出。
  
  3、PBS清洗3遍,剥去外膜,用手术刀片刮去内膜,留下中膜并将其移入1mL的培基中、剪成1x1mm2大小组织块。
  
  4、再将PBS清洗组织块,移入25mL的培养瓶中,用尖嘴弯管均匀贴好组织块,放入37℃、5%CO2的培养箱倒置培养6小时后,待组织块贴壁后,再加入2.5mL培养液后放回培养箱中。
  
  5、随后每3天予以全量换液。
  
  大鼠主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。